第一讲：凝血指标的影响因素分析——标本采集

凝血四项（PT、APTT、TT、FIB）检查是临床上最常用的凝血功能初筛试验，主要用于出血性疾病的筛查和诊断、抗凝药物治疗监测以及术前凝血功能的评估等。然而临床部分患者会出现凝血四项结果异常却无出血倾向的情况，在排除了仪器及患者自身因素外，我们可能需要考虑标本不合格导致的结果异常。影响标本质量的因素很多，接下来探讨一下标本采样量对凝血结果的影响。

标准样本量采集的多少取决于采血管中抗凝剂的量，目前临床上凝血四项检查采用的抗凝方法是：0.109mol/L的枸橼酸钠与全血标本以1：9比例混匀，即抗凝剂0.3ml加入静脉血2.7mL，这一比例是以血标本HCT值在正常范围内时设定的，实质是抗凝剂与血浆比例约等于1：5，即抗凝剂0.3mL，血浆1.5mL，其原因与抗凝剂的抗凝原理和凝血四项的试验原理相关[1]。抗凝剂的抗凝原理为抗凝剂与钙形成螯合物，进而阻止血液凝固。因为钙在凝血过程中可以通过介导凝血因子与磷脂表面结合形成复合物加速凝血因子激活，促进内源性凝血途径与外源性凝血途径活动的发生。在进行凝血四项检测过程中，必须在血液标本离心血浆中加入适量的钙，起到恢复血液凝固的作用。抗凝时的去钙和试验时的复钙决定了抗凝比例的实质是抗凝剂与血浆的比例。

HCT升高的患者血浆量少从而导致抗凝剂相对过量（稀释效应）[2]，抗凝时去除的钙离子多于检测时所添加的钙离子，导致PT、APTT延长。而TT、FIB检测无钙离子的参与，不会出现异常。

下面来看一组不同HCT值标本对凝血结果影响的实验数据分析：

实验[3]将HCT＜0.25归为低压积组，HCT在0.25和0.60之间的归为中压机组，HCT＞0.60的归为高压机组。

表1 不同压积组患者校正采血量对凝血四项检测结果产生变化（s）

从表1可以看出，在低压积组中，试验组PT、APTT较对照组均明显缩短；高压积组中试验组PT、APTT结果较对照组均明显延长，差异具有统计学意义（P<0.05）；中压积组中试验组凝血四项检测结果与对照组相比，差异无统计学意义（P>0.05）。说明当患者HCT过高或过低均会对凝血指标造成影响。

❓如果遇到HCT异常患者该如何解决？

目前美国临床实验室标准化协会（CLSI）建议20%＜HCT＞55%时，按如下计算公式调整抗凝剂用量，抗凝剂剂量=0.00185×（100-HCT）×总采血量[4]。由于无法肉眼判断HCT高低，所以抗凝剂的校准是个复杂的过程。

现在实验室大多采用的是含有0.2ml固定剂量抗凝剂的真空负压管，为了方便临床采血操作，可根据以上公式进行演变[5]：

总采血量=抗凝剂剂量/{0.00185×（100-HCT）}将固定抗凝剂用量带入公式为：总采血量=108.11/（100-HCT）

这样我们可以根据患者HCT进行采血，不需要调整抗凝剂剂量，以便于临床采血样本。

最后，在此提醒各位实验室人员，对于凝血结果异常时，要综合分析问题，给临床提供准确可靠的诊断依据。【参考文献】[1]赵羚,马聪,韩丁丁,高玉娟,苏雁华.凝血四项检测结果的影响因素分析[J].医学综述, ,24(16): 3264-3268.[2]Arif H. Kamal,Ayalew Tefferi,Rajiv K.Pruthi. How to Interpret and Pursue an Abnormal Prothrombin Time, ActivatedPartial Thromboplastin Time, and Bleeding Time in Adults[J]. Mayo ClinicProceedings,,82(7).[3]周传奇,乔秀莲,周晓丹.血常规结果在保证凝血测定结果准确性中的应用分析[J].饮食保健,,6(31):260.[4]娄峻,王森钰,邱卫强.抗凝剂校正公式在凝血四项检测中的应用[J].实用检验医师杂志, ,6(03): 189-191.[5]喻宁芳,邓穗德,潘海祥,李荣新,岑美婷.低HCT患者凝血四项的抗凝剂剂量实验观察[J].实用检验医师杂志,,5(04):257-258.声明：本文所有内容出于非商业性目的，仅用于学习交流和分享。当内容涉及引用已发表的文献时，我们均在文章结尾[参考文献]处进行出处文献标注。如涉及版权等问题，请原作者直接联系我们，我们将在第一时间进行更正或删除，谢谢！联系邮箱：wangziyi@.

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