尽管有大量的研究和临床试验，但是目前仍尚未开发出针对复杂病原体如HIV、结核病（TB）和疟疾的高效疫苗。 阻碍这种发展的原因之一，就是缺乏对人体应对病原体免疫防护机制的深入了解。多色流式细胞仪，特别是多达28色流式，可以识别风险或保护的免疫相关性。
在One Dintwe等人所在的HIV疫苗试验网络（HVTN）实验中心内，一般用细胞内细胞因子染色（ICS）量化和分析T细胞对候选疫苗的反应。他们小组设计了一管26色方案《OMIP-056: Evaluation of Human Conventional T Cells, Donor-Unrestricted T Cells, and NK Cells Including Memory Phenotype by Intracellular Cytokine Staining[1]
方案
方案主要包括了： 1）谱系和死活染料：CD3、CD4、CD8、CD14、UViD; 2）功能性标志物：IFN-γ、IL-2、TNF-α、CD40L、IL-17、颗粒酶A、Th2细胞因子（IL-4/IL-13组合，同一通道）; 3）记忆标记：CCR7、CD45RA; 4）其他谱系标记：γδTCR、CD56、CD16; 5）MAIT细胞：CD161、CD26、Vα7.2; 6）活化：HLA-DR; 7）用于辅助T细胞分类的趋化因子受体：CXCR3、CCR6； 8）其它功能性标记：IL-22、perforin 9）分化标记：KLRG- 1、PD-1
设门方法
设门步骤及其作用，基本上写在图上了，相信应该比较清晰明了。 一共7组图：
有了这些方案资料和设门图，相信你对于常规T细胞的功能检测，以及γδT、MAIT、NK、单核亚群等检测会有相当程度的了解吧。
References
[1] OMIP-056: Evaluation of Human Conventional T Cells, Donor-Unrestricted T Cells, and NK Cells Including Memory Phenotype by Intracellular Cytokine Staining: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30919583
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